期刊简介

《中国防痨杂志》为专业学术类期刊。全面报道我国结核病防治的方针政策与最新的科研成果及国内外结核病控制的最新发展动态。主要栏目有专论(专稿、专访、专题),论著(结核病控制、流行病学、临床和基础),论文摘要,短篇报道,病历报告,临床病理讨论、综述、讲座、座谈会健康教育、史料资料、会议简况、防痨协会工作简报等。读者对象为从事结核病控制、临床、基础科研防痨工作者。

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  • 杂志名称:中国防痨杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国防痨协会
  • 国际刊号:1000-6621
  • 国内刊号:11-2761/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:维普收录(中), 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
中国防痨杂志2012年第08期

结核分枝杆菌Rv3803c、Rv3846基因的克隆、表达、纯化与鉴定

孙毅凡;李海成;周杰;钱明;陈涛;江勇;赖赛麟;江振友;钟球;周琳

关键词:分枝杆菌, 结核, 抗原, 细菌, 细菌蛋白质类, 超氧化物歧化酶
摘要:目的 克隆结核分枝杆菌Rv3803c和Rv846基因,并在大肠埃希菌(E.coli)中进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组 DNA为模板,应用PCR方法扩增出Rv803c和R73846基因片段,克隆至pGEX-6P-1表达载体中,测序正确后,在E.coli Rosetta中诱导表达,GST标签亲和层析法纯化蛋白,考马斯亮蓝染色及Western-blot分析鉴定.结果 重组质粒pGEX- Rv3803c、pGEX-R v3846测序表明核苷酸序列与设计完全一致.其在E.coli Rosetta中的存在形式均为可溶部分约50%、包涵体约50%,相对分子质量约为56000和45000,纯化的GST-Rv3803c、GST-Rv3846样品纯度90%以上.完整的GST-Rv3803c的浓度大约为0.1 mg/ml,完整的GST-Rv3846的浓度大约为0.5 mg/ml.即相当于每升E.coli Rasetta培养物中,GST-Rv3803c产量为:0.25mg/L、GST-Rv3846产量为1.25 mg/L.结论 成功获得了纯化蛋白Rv3803c(MPT51)和Rv3846(SodA),为进一步研究MPT-51和SodA蛋白的辅助诊断价值、构建保护性疫苗提供了实验依据.